Витрификация ооцитов

Криоконсервация ооцитов – процесс замораживания половых клеток женщины после их аспирации из яичников.

Другое название процедуры – витрификация. Она предусматривает сохранение жизнеспособности женской гаметы в специальном криохранилище. Половую клетку в будущем после размораживания можно будет использовать для экстракорпорального оплодотворения (ЭКО).

Цель проведения витрификации

До недавних пор ЭКО было чем-то фантастическим и нереальным. Тем не менее, наука движется вперед, а новые технологии и современное оборудование сделало процесс безопасного сохранения яйцеклеток вполне обычным делом для репродуктивных центров и клиник.

Криоконсервация ооцитов используется ими, как самый надежный способ хранения гамет в жизнеспособном состоянии. Главной особенностью витрификации остается отсутствие кристаллов льда в цитоплазме ооцитов, что предотвращает нарушение их функциональности и внутренней структуры. Таким образом, достигаются идеальные условия для длительного хранения биоматериала.

Кому показана криоконсервация яйцеклеток

Женщина способна к зачатию с момента наступления половой зрелости до начала менопаузы, но максимальная репродуктивная способность сохраняется в промежутке с 20 до 35 лет. В это время созревает максимальное количество здоровых жизнеспособных яйцеклеток. После тридцати пяти лет число ооцитов существенно снижается, что сказывается на фертильности. Гинекологи и репродуктологи советуют обзаводиться потомством именно в этот период. Однако современный ритм жизни диктует женщинам свои правила. Представительницы прекрасного пола предпочитают строить карьеру, приобретать недвижимое имущество, открывать счет в банке, и только потом задумываться о продолжении рода. Как показывает статистика, впервые выявление бесплодие диагностируется у женщин 35+.

Показания к заморозке ооцитов:

• При планировании использования протокола экстракорпорального оплодотворения с суперовуляцией. Гаметы консервируются для того, чтобы избежать дополнительной гормональной нагрузки.
• Отсутсвие возможности провести гормональную стимуляцию и в этом же цикле имплантировать оплодотворенную яйцеклетку.
• Заболевания женской репродуктивной системы, склонные к быстрому прогрессированию, которое чревато снижением фертильности.
• Планируемая сложная терапия, оказывающая токсическое влияние на половую систему (консервативное лечение злокачественных новообразований или системных заболеваний).
• Высокая вероятность раннего наступления менопаузы (отягощенная наследственность, дисгормональные заболевания).
• Оперативное лечение, предполагающее иссечение придатков.
• Желание пациентки. Многие женщины планируют беременность на более поздний срок. Для исключения возрастного фактора, они замораживают свои яйцеклетки.
• Участие в донорской программе. У некоторых пар возникают ситуации, когда необходима донорская яйцеклетка, например, у женщины диагностирован синдром пустых фолликулов. Они обращаются к другим вспомогательным репродуктивным технологиям, предполагающим использование донорского материала. Такой ооцит искусственно оплодотворяется спермой биологического отца, и подсаживается пациентке. Донорство проходит анонимно. В анкетах указываются фенотипические, конституциональные и возрастные характеристики.

Подготовка к криоконсервации ооцитов

Специалисты рекомендуют проходить процедуру до 35 лет. В старшем возрасте на фоне метаболических изменений значительно увеличивается число хромосомных мутаций. Перед процедурой женщина проходит ряд обязательных диагностических процедур:

• Обследование крови (клиническое, биохимическое, групповое, гормональное, вирусное);
• Обследование мочи;
• Мазки на половые инфекции и атипичные клетки;
• Сонографическое исследование репродуктивных органов – позволяет диагностировать отсутсвие или наличие объемных новообразований в полости малого таза. Некоторые из них требуют оперативного иссечения. Другие – могут создавать механическое препятствие при проведении пункции.

В зависимости от ситуации комплекс процедур может быть расширен. Иногда требуется консультация смежных специалистов. Также доктор, курирующий процедуру, проводит подробный опрос, касательно анамнеза жизни и наличия наследственных патологий. Большинство противопоказаний носят относительный характер. При выявлении инфекционно-воспалительных процессов, требуется их лечение. После курса терапии диагностические мероприятия повторяются.

Изъятие материала проводится в условиях лаборатории. Предварительные подготовительные мероприятия:

• За 14 дней до манипуляции запрещается прием кофе и алкоголя. Также нельзя курить.
• За три дня показан половой покой (с исключением не только половых контактов, но и мастурбации).
• Крайний прием пищи должен быть за 8 часов до процедуры. Запрещен фаст-фуд, жирные, острые и жареные блюда.

Алгоритм процедуры

Весь процесс витрификации можно представить в виде следующей последовательности процедур и манипуляций:

1. Проводится первичный осмотр женщины врачом репродуктологом. Он должен подтвердить безопасность изъятия у нее ооцита.
2. Женщина должна пройти ряд исследований, которые необходимы для подтверждения отсутствия у нее противопоказаний к проведению данной процедуры.
3. Проводится медикаментозная стимуляция овуляции с применением гормональных препаратов. Под контролем ультразвукового исследования врач следит за процессом роста и дозревания фолликулов в яичниках.
4. В тот момент, когда самый большой фолликул достигает размеров в 18-22 мм, проводится инъекция хорионического гонадотропина.
5. Спустя 1,5-2 сутки с помощью специальной аспирационной иглы под местной (иногда общей) анестезией проводится изъятие яйцеклетки из организма женщины.
6. Дальше врачам необходимо «очистить» полученный биоматериал от вторичных примесей, дополнительных фолликулярных клеток-сателлитов и отобрать самые большие и жизнеспособные ооциты.
7. Проводится специальная подготовка полученных клеток с их замораживанием в жидком азоте. Его температура равна -196оС, что обеспечивает практически моментальное охлаждение до нужного состояния.

В таком виде клетки хранятся в специальных криобанках для биоматериалов. Криоконсервация ооцитов позволяет потом их использовать для экстракорпорального оплодотворения вне женского организма с последующей имплантацией эмбриона в матку матери.

Подобная процедура в основном проводится в процессе участия женщины в программе донорства ооцитов, для сохранения здоровых гамет молодой девушки при ее желании забеременеть в будущем. Также отдельные пациентки, которым требуется радиотерапия, сдают свои ооциты на хранение для сохранения возможности материнства после лечения.

Читайте также: Как устроено донорство яйцеклеток

Размораживание ооцитов

Процесс размораживания яйцеклеток проводится в лабораторных условиях опытным персоналом. Доктор постепенно снижает объем криопротектора, замещая его водой. Когда яйцеклетки достигнут температуры тела, их оплодотворяют семенной жидкостью. В течение пяти дней полученный биоматериал держат в условиях инкубатора. После начала стадии деления, бластоцисту пересаживают в полость матки.

Вопреки общественному мнению, после криоконсервации яйцеклетки, не только сохраняют свою фертильную способность, но и умножают ее. Согласно статистическим данным, размороженные ооциты на 15% жизнеспособнее, чем «свежие» гаметы. Этому факту есть научное объяснение. Перед замораживанием яйцеклетки подвергаются дополнительной диагностике на уровень фертильности.

Применение криоконсервированых яйцеклеток

Замораживание половых гамет – строго добровольная медицинская процедура. Накануне манипуляции пациентка подписывает соответствующие документы. В дальнейшем биоматериал может использоваться для:

1. Программы отложенного материнства. Некоторые пациентки планируют иметь детей только после 35 лет в связи с личными убеждениями. Но с возрастом фертильная способность снижается, что затрудняет процесс естественного оплодотворения. Во время овуляции из фолликулов не выходят жизнеспособные здоровые яйцеклетки. Для страховки женщины консервируют ооциты. Такой биоматериал не может быть использован в донорской программе.
2. Повторной процедуры экстракорпорального оплодотворения. Манипуляция предполагает подсаживание пациентке одной или двух оплодотворенных яйцеклеток. При этом после стимуляции гормональными препаратами, созревает не менее восьми ооцитов. Оставшийся биологический материал замораживают, и при условии неудачной первичной имплантации, подсаживают во время следующего цикла. Такая процедура позволяет избежать дополнительной гормональной нагрузки, отрицательно сказывающейся на здоровье пациентки. В медицинской практике встречаются ситуации, когда женщине противопоказано введение больших доз биологически активных препаратов. Поэтапная заморозка позволяет накопить определенное количество ооцитов для процедуры ЭКО.
3. Предотвращения поражения яйцеклеток. Заболевания, лечение которых сопровождается лучевой- или химиотерапией, снижают репродуктивную способность. Сами злокачественные новообразования также негативно воздействуют на фертильную способность, за счет нарушения метаболических процессов и общего истощения организма. Если пациентке предстоит длительная терапия с использованием сильных антибактериальных или противовирусных препаратов, яйцеклетки также криоконсервируются.
4. Участия в программе донорства. Пациентки с некоторыми патологиями не могут иметь детей в связи с отсутствием ооцитов. Они могут обратиться к донорской программе. Донором может стать близкий родственник (сестра) или неизвестный человек. Банк ооцитов содержит большое количество биологического материала. В анкетах содержится информация касательно фенотипических и конституционных особенностей. Имя донора держится в строжайшем секрете.

Таким образом, криоконсервация женских половых гамет проводится не только по медицинским показаниям, но и по личному желанию.

Преимущества и недостатки криоконсервации ооцитов

Плюсы процедуры:

• Неограниченное время хранения генетического материала. Медицинской практике известны случаи рождения здоровых детей, зачатых при использовании ооцитов, хранящихся более 30 лет. Биологический материал может быть уничтожен только по требованию пациентки.
• Высокая сохранность материала. После размораживания более 80% гамет полностью сохраняют свою репродуктивную способность.
• Безопасность процедуры для плода. Использование материала не сопровождается повышением риска развития хромосомных дефектов и врожденных пороков развития.
• Приемлемая стоимость, делающая процедуру доступной значительной доле населения.

Манипуляция имеет ряд минусов, косвенно с ней связанных:

1. Развитие синдрома гиперстимуляции. На фоне введения больших доз гормонов, в организме может возникнуть ряд патологических изменений, требующих медицинской коррекции. Это достаточно редкое состояние. Каждой пациентке подбирается индивидуальный курс (длительность приема, дозировка и разновидность препарата). При появлении подозрительных симптомов, прием медикаментов прекращается. Нельзя самостоятельно заменять препараты или схему их приема. Гормональная стимуляция должна проходить под строгим врачебным контролем.
2. Механическое повреждение во время пункции. Забор биологического материала производится специальной иглой. Ее вводят под контролем ультразвука. Если процедура проводится квалифицированным персоналом с соблюдением всех правил, риск повреждения соседних органов минимален.
3. Присоединение вторичной инфекции. Встречается при несоблюдении правил асептики. Такое состояние проявляется повышением температуры, общей слабостью, тахикардией и тянущими болями внизу живота. Требует назначения антибактериальных препаратов.
4. Эмоциональное потрясение. В редких случаях после размораживания ооциты теряют фертильную способность или процесс искусственного оплодотворения сопровождается неудачей. Женщина, априори имеющая проблемы психологического характера, теряет уверенность в себе, становясь нервной, раздражительной и агрессивной. В ряде случаев требуется помощь специалистов.

В целом, процедура криоконсервации позволяет множеству пациенток испытать радость материнства.

Использованная литература:

1. Смирнова А.А., Тур-Каспа И. Криоконсервация ооцитов человека: клинические исходы. Проблемы репродукции 2005; № 1: 14–8.
2. Alikani M., Cohen J. Human oocyte and embryo cryopreservation. Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 1990; 5 (2): 714–7.
3. Бесплодный брак. Современные подходы к диагностике и лечению. Под ред. В.И. Кулакова. М.: ГЭОТАР-Медиа. 2006. - 616 с.